トレーニング情報

2022年度 第21回ABiS電子顕微鏡トレーニング
「急速凍結法を用いたCryo-TEM観察」

開催日程:2023年1月16日(月)・17日(火) → 2023年3月22日(水)・23日(木)に変更

開催場所:兵庫県立大学 播磨理学キャンパス 研究2期棟
      〒678-1205 兵庫県赤穂郡上郡町光都3-1-2

      ※JR山陽線/山陽新幹線・相生駅南口よりウエスト神姫バス「SPring-8」行きのバスに乗車し、
      「県立大理学部」(約22分)にて下車。徒歩3分。
      ※バス時刻表
       http://www.spring8.or.jp/ja/about_us/access/bus_schedule

開催概要

開催目的

 本トレーニングは、氷包埋法による凍結試料作製から、クライオ透過電子顕微鏡(Cryo-TEM)を用いた画像取得までの実践的なトレーニングを行います。
 現在、生体試料(細胞、ウイルス、タンパク質)や、液体試料(エマルジョン、インク)などの含水試料を、一切の化学固定・脱水操作を行わず、水を含んだ状態のまま観察できる手法として、幅広い分野でCryo-TEMが注目されています。しかし、非晶質の薄い氷膜内に試料を包埋する(これを氷包埋という)浸漬凍結法や、凍結試料をCryo-TEMで観察するための実験操作、さらに事前に実施すべき予備実験等も含めて、それぞれの研究室ごとに継承されてきた独自のノウハウがあり、これらを身に付けなければ“まともな” クライオ観察はできません。
 そこで今回のトレーニングでは、環境制御型急速凍結装置(Leica EM GP)を用いた氷包埋試料の作製と、汎用の透過電子顕微鏡(JEM-2100)に、サイドエントリー型クライオトランスファーホルダー(GATAN 914)を組み合わせたCryo-TEMの入門編となるトレーニングを行います。

 

主な使用装置

・環境制御型急速凍結装置EM GP (LeicaMicrosystems)
(参考;Vitrobot Mark IV (ThermoFisherScientific))
・親水化処理装置 IB-3 (Eiko)
・透過電子顕微鏡 JEM-2100 (JEOL)
・クライオ試料ステージ GATAN 914 (GATAN)
・CMOSカメラシステム TemCam-F216 (TVIPS)

 

スケジュール

1月16日(月)
  9:50 受付開始(相生駅発のバスの時刻表をご確認ください)
  10:00~13:00 講義
(1) 急速凍結法(氷包埋)
(2) Cryo-TEM法(ネガティブ染色法からCryo-TEM観察まで)
(3) Cryo-TEMでの画像取得法(CMOSカメラ)
(4) 最新技術;培養細胞のためのマイクロパターニング処理の紹介(on-line)
  14:00~16:00 実習
(1) Leica EM GPを用いた浸漬凍結(氷包埋)
(2) クライオトランスファーホルダーの準備
(3) 試料の保存方法
  16:00~17:00 質疑応答・まとめ
 
1月17日(火) 実習
  10:00~13:00 浸漬凍結・Cryo-TEM観察(1)
  14:00~16:00 浸漬凍結・Cryo-TEM観察(2)
  16:00~17:00 質疑応答・まとめ

 

 

※トレーニングは2日間のコースとなっていますが、ご都合により午前または午後だけの参加や、1日間だけの
参加でも問題ありません。その場合、備考欄に参加日時を明記して下さい。

 

講師

西野有里・宮澤淳夫(兵庫県立大学大学院生命理学研究科)

伊藤喜子(ライカマイクロシステムズ(株))

荒牧慎二(TVIPS)

水流功春(プライムテック(株))

 

受講対象

・試料の急速凍結技法、ならびにCryo-TEM観察に興味のある方
・研究・開発・評価などの仕事でクライオ電子顕微鏡法に従事される方

 

※Cryo-TEMの対象試料:
タンパク質分子、細胞小器官、ウイルス、培養細胞(モノレイヤーや単細胞など)、
エマルション、リポソーム、インク(粒径や分散対象が100nm程度のもの)

 

主催

学術変革領域研究(学術研究支援基盤形成) 先端バイオイメージング支援プラットフォーム(ABiS)

日本顕微鏡学会 生体解析分科会

兵庫県立大学 大学院生命理学研究科

ライカマイクロシステムズ(株)

 

定員

10名(科研費採択者またはその関係者5名程度を含む)

 

参加費

10,000円

      

※トレーニング会場受付にて、現金でお支払いください(領収書をお渡しいたします)

 

申込締切日

2023年1月10日(火)

 

申込方法

下記、Webサイトより必要事項をご記入の上、お申し込みください。

https://xlab.leica-microsystems.com/workshop/abis_jan2023

※トレーニングへの申込時に役職の明記をお願いします。学生の場合は役職欄に学年の記載をお願いします。

※科研費採択者および関係者は、お申し込みの際に備考欄に下記について記入をお願いします。
・科研費採択情報(種目、課題名、研究期間、研究代表者)
・ご自身が科研費に採択されていないポスドク・大学院生等は、指導教員の科研費採択情報

 

その他

定員になり次第、締め切りとなりますのでご了承ください。

トレーニングの様子を撮影することがあります。予めご了承ください。

 

以上

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