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文部科学省科学研究費補助金「特定領域研究」細胞核ダイナミクス
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FRETによる単一生細胞でのPMLボディ生理機能の可視化
しきり線
東北大学 大学院生命科学研究科 十川 和博 平成17−18年度
 

 タイムドメインによる蛍光寿命計測が可能なFLIM顕微鏡装置を完成させ,生細胞におけるタンパクータンパク相互作用を解析した。低酸素応答に機能するpVHL-Elongin B-Elongin C複合体の解析を行い,下図のように相互作用をドナー分子(Cerulean)の蛍光寿命短縮とアクセプター分子(Citrine)の寿命曲線のライズを観察した。同様にElongin CとpVHLの相互作用にElongin BによるElongin Cのコンフォメーション変化が必要なことを示した。さらに解糖のGAPDHとPGK相互作用,転写因子LBP-1間の相互作用,PMLボディー局在転写因子Arntダイマーの解析などを行い,ポジティブな結果を得た。

図

 

発表論文リスト:

  1. Ternary complex formation of pVHL, elongin B and elongin C visualized in living cells by a fluorescence resonance energy transfer-fluorescence lifetime imaging microscopy technique.
  2. K. Kinoshita, K. Goryo, M. Takada, Y.Tomokuni, T. Aso, H. Okuda T.Shuin; H. Fukumura, and K. Sogawa FEBS J.274, 5567-5575 (2007)
         
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